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ATP 熒光檢測原理 --生物熒光

    ATP(Adenosine Triphosphate,三磷酸腺苷)是各種生命活動能量的直接來源,存在于所有活的動植物細胞、細菌和食物殘渣中。ATP 熒光檢測法是根據螢火蟲發光原理開發的快速檢測技術。即有氧條件下,蟲熒光素酶催化蟲熒光素和 ATP 之間發生氧化反應形成氧化熒光素并發出熒光,其強度與微生物數量呈比例關系。

ATP熒光檢測儀原理及應用

ATP熒光檢測儀原理及應用

圖:所有生物細胞均含有ATP

熒光檢測作用機理如下:

    ATP快速檢測衛生監控系統(以下統稱為 ATP 熒光檢測儀)即是通過檢測熒光信號的強度從而得知待測目標被細菌、食物殘渣等污染的程度,因此 ATP 的檢測可以作為判斷是否潔凈的指標。

與其它評估方法相比,ATP 快速監控具有以下明顯優勢:

1). 實時監控:熒光素酶/熒光素/ATP 反應為即時反應,讀數可以在數秒之內得到。因此可根據結果立即采取糾正措施。

2). 良好的可靠性和一致性:ATP 熒光檢測儀可以確定出各種有機物和/ 或微生物殘渣的存在。另外由于它使用獨有的液體穩定試劑,因而檢測結果準確、重復性好,為真實的潔凈程序評估提供了可靠依據。

3). 直接和間接危險性評估:ATP 檢測的是表面已有的生物物質和有生物 殘留物、易滋生微生物的潛在危險區域。食物殘留區域是最易受到微生物污染或 最易發生交叉污染的地方。

4). 使用簡便:非專業技術人員也可輕松使用 ATP 熒光檢測儀、拭子和軟件,這使得日常使用趨于簡單化。

5). 結果易于判讀:標本檢測結果以相對發光單位(RLU)來顯示,它代表了污染物產生的光總量。檢測結果可以直接與通過(Pass)/不通過(Fail)數值進行 比較,通過則屏幕上顯示為對號(√);略微超出期望值的則顯示警告符號(?。?, 即介于通過和不通過之間的數值;結果超出**限量值則顯示叉號(×)。RLU讀數越小表示表面越潔凈。

ATP 熒光檢測儀應用進展

    ATP 生物發光技術產生于20 世紀70年代中期。1983 年,Moyer等最早 提出細胞內源性ATP的含量可以反映細胞的活性和活細胞的數量。同年 Gronroos等也證實該技術是一種可靠、靈敏度高的確定細胞活性度的檢測方法。20 世紀 80 年代,英國人首先研制出ATP檢測儀檢測系統,隨后發展到歐洲、 美國和日本。應用范圍涉及食品加工、超市和飲食行業,檢測內容包括微生物和 食品殘渣。1998 年,日本國會頒布了《關于食品制造過程管理高度化臨時措施法》,其中即包含了應用 ATP 檢測儀檢測系統的內容。1999 年,日本還成立了 ATP 涂抹檢查研究會,專門研究該方法的使用效率和應用領域,其內容之一就是在食品衛生監測領域中,解決現場微生物的檢測問題。20 世紀末,一些 ATP檢測儀檢測系統及技術被引進我國,到目前為止,除個別省級衛生監督檢測單位裝備外,主要是在一些外資或合資企業中自行檢測使用。2002 年,我國衛生部頒發了食品加工企業 HACCP 實施指南,鼓勵食品加工企業引入ATP檢測系統。 近年來,蟲熒光素酶已通過基因工程生產,價格大幅度降低,而且 ATP 生物發 光法在檢測食品微生物時簡單、快速且靈敏度高, 隨著相關儀器的小型化,ATP 生物發光技術必將會在國內相關行業得到迅速普及。

2.ATP熒光檢測儀的應用

ATP熒光檢測儀通過生物發光原理對液態樣本中的菌落總數進行檢測,其中芯片的設計可以同時滿足6個樣本的檢測,試劑用量少,效率高,可以應用在食品安全和環境領域。

ATP熒光檢測儀在食品加工設備與環境方面應用

ATP熒光檢測儀在食品加工設備與環境方面應用

圖為 .ATP熒光檢測儀在食品加工設備與環境方面應用

ATP熒光檢測儀在零售業餐飲衛生和人員衛生方面應用場景

圖2.ATP熒光檢測儀在零售業餐飲衛生和人員衛生方面應用場景

ATP的主要來源

①微生物:細菌、酵母&霉菌;

②食品:水果、乳制品、蔬菜、肉類等;

③人員。

4.ATP的主要來源

ATP的主要來源

ATP與微生物關系

5.ATP與食物和微生物的關系

ATP與食物和微生物的關系

ATP熒光檢測儀的特點

    ATP熒光檢測儀具有快速、準確、靈敏、簡便、可靠等優點,能迅速的獲得檢測結果。

ATP熒光檢測儀的優點及特點

ATP熒光檢測儀的優點及特點



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